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这个流式应用可能会成为下一个风口

更新时间: 2019-06-13

  应用的探索,是众多流式行业的人苦苦追寻的“小太阳”,但是,这个“太阳”不好追。

  2017年8月15日《Reprod Domest Anim》杂志上一篇综述,给我们介绍了一个可能有着光明前景的应用领域:男性不育。

  男性不育对大部分寻求生殖医学干预的夫妇都有影响。在人类患者中,仅有20%的病例可以被正确诊断,而其余的病例被归类为特发性或未知来源(Amaral,Castillo等,2014)。然而,当前的精液分析仍然基于光学显微镜,根据染料排除法来测定精子数量、运动性、形态和膜完整性。许多男性不孕症病例仍未确诊。精子生物学的最新进展使得人们可以采用新的手段来探索和诊断这些特发性不育症。

  诸如质谱法的技术已经使得我们能够以前所未有的深度去了解存在于人类和其他哺乳动物精子中的蛋白质。然而,尽管这些技术具有高通量的特点,但大多数只能提供整个精子群体的平均值。然而,是非常异质的,平均值可能掩盖相关的生物信息。

  流式细胞术可以克服这个缺点,流式能够检测单细胞特征,并且可分选出靶细胞进行单细胞水平的蛋白质组学分析。此外,流式细胞术的进展,使得单细胞多参数分析并结合强大的统计工具,能极大的拓展精子学这个生殖方面的子领域。

  多参数流式结合单细胞水平蛋白质功能研究,能够快速拓展精子生物学知识,同时适用于生殖医学和生殖相关生物技术。在精子学领域可能有两个主要发展方向:

  2、基于单细胞蛋白质功能研究,对精子功能的了解可能会迅速扩大,包租婆。从而能进行更好的诊断测定、鉴定治疗靶标以及研发治疗男性不育症的潜在方法。

  该篇综述概括了2017年前历年主要的精子蛋白质分析文献,我们编译一下,分享如下:

  下面结合典型图形,来看一下流式在男性生殖领域的一个典型应用——多参数流式确定精子活力。

  首先,通过Hoechst33342标记精子,在Hoechst33342/FSC中选出精子,然后在Hoechst33342/7-AAD散点图,可见三类精子:最上面的7-AAD+的死精子(50.4%)、最下方的7-AAD-的活精子(19.5%),那么中间这类精子7-AAD弱表达的,究竟算死精还是活精呢?

  再加上一个caspase-3,就能看到精子在7-AAD/caspase-3的散点图分群更清晰而且明确:caspase3+ 7-AAD+的死精子、caspase-3-7-AAD-的活精子,之前我们确定不下来的中间这类7-AAD弱表达的caspase-3表达高,提示是发生凋亡的精子。

  上面这种层次的研究,目前暂时未应用在临床检测上,但如果开发得当,或许能够为男性生殖医学提供更好的数据支撑和方向指引。





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